產品名稱:Reverse Tranase
中文名稱:逆轉錄酶(反轉錄酶)
產品編號與包裝規格:
編號 | 產品名稱 | 規格 | 產品介紹 | 產品價格 |
HKE123-01A | Reverse Tranase | 10000U | 逆轉錄酶(反轉錄酶) | 645 |
產品描述:本制品是通過基因重組技術克隆表達M-MuLV的缺失突變型 RNase H-的反轉錄酶。一般的嘢生型M-MuLV(Moloney Murine Leukemia Virus)具有以下幾種活性:依賴于RNA的DNA聚合酶活 性;依賴于DNA的DNA聚合酶活性;RNase H活性。由于RNaseH 能夠催化降解 DNA/RNA雜合體中的RNA,因此在cDNA第—條鏈 的合成反應中可能會降解RNA/DNA雜合體中的模板RNA。本酶的 RNase H活性缺失,延伸能力強,可用于較長的cDNA合成,高比 例的全長cDNA文庫的構建以及Real Time RT-PCR反應等。
反轉錄酶 產品用途:
1) 1st Strand cDNA的合成;
2) cDNA Probe的制備;
3) RT-PCR反應以及Real Time RT-PCR反應。
保存溫度:-20℃。
產品反應 Buffer 中含有高濃度的 DTT,低溫下或者凍融可 能會導致沉淀析出,請恢復至室溫并輕搖混勻后使用。
Reverse Tranase 產品包裝(A包裝):
反轉錄酶 質量保證:經多次柱純化,SDS-PAGE 膠檢測僅可見清晰單一 目的條帶,PCR 方法檢測無大腸桿菌 DNA 殘留,無核 酸內、外切酶污染,無 RNA 酶污染。
反轉錄酶 活性定義:以Poly(rA)?Oligo(dT)為模板/引物,在37℃、10 分鐘條件下,摻入1 nmol的[3H] dTTP所需要的酶量定 義為1個活性單位。
逆轉錄酶 操作方法與常用PCR循環:
使用Reverse Tranase 注意事項:
1) 用DEPC處理實驗用到的所有實驗器材,或者 購買已經證明無核酸酶的實驗用具,實驗過程戴手套 并經常更換手套,避免RNA酶的污染。
2) 確保所用試劑及超純水中無RNA酶污染。
3) 純化過的RNA必須保證不含有鹽,金屬離子, 乙醇和苯酚,以上成分會干擾第—鏈cDNA的合成反 應。可采用乙醇沉淀RNA的方法去除掉痕量污染物。
4) 為保證反轉錄反應的有效進行,需使用高質量 的RNA模板。