【產品名稱】
大腸菌群顯色培養基
【產品用途】
用于大腸菌群的快速檢測和計數。
【檢驗原理】
蛋白胨和酵母膏粉提供碳氮源和微量元素;氯化鈉可維持均衡的滲透壓;瓊脂是培養基的凝固劑;十二烷基硫酸鈉抑制革蘭氏陽性菌;顯色底物與大腸菌群β-半乳萄糖苷酶發生特異性反應,水解底物,釋放出顯色基團,在淡黃色平板上產生綠色的菌落。
【配方】
大腸菌群顯色培養基培養基配方(每升):
蛋白胨 10g
酵母膏粉 3g
氯化鈉 5g
十二烷基硫酸鈉 0.1g
瓊脂 12g
顯色底物 2.7g
終pH 7.0±0.2
【使用方法】
1、稱取本品32.8g,加入蒸餾水或去離子水1 L,攪拌加熱煮沸至*溶解,分裝三角瓶,無需高壓滅菌。
2、以無菌手續取樣品25g或25mL,加入含225mL無菌磷酸鹽緩沖液(或生理鹽水)的三角瓶內,充分振搖或用均質器均質1min成1:10稀釋液,然后以1:10繼續稀釋,選擇三個適宜的連續稀釋度,每個稀釋度接種兩個平皿。
3、采用傾注法:將培養基水浴冷卻至約50℃,準備直徑90mm已滅菌平皿,每個培養皿接種1ml樣品,然后傾注約15ml上述溶解的培養基,混勻使其凝固,倒置,37℃培養24小時。
4、 采用表面接種法:冷卻至約50℃,搖勻將培養基傾注于已滅菌平皿中。在室溫可保存一天或在冰箱里貯存數天(避光,4℃)。樣品用劃線接種法或濾膜法,37℃培養24小時。
5、觀察結果。
【質量控制】
本品傾注平皿后呈淡黃色,下列菌株接種后于36±1℃培養18~24h生長情況如下表:
貯 存:貯存于10-30℃,避光、陰涼干燥處,用后立即旋緊瓶蓋。貯存期二年。