【產品名稱】
霍亂弧菌顯色培養基
【用途】
霍亂弧菌顯色培養基用于水產品及食物中毒樣品中霍亂弧菌的分離和鑒定。
【原理】
蛋白胨和酵母膏粉提供氮源、維生素、氨基酸和碳源;蔗糖為可發酵的糖類;抑菌劑抑制大部分非霍亂弧菌細菌,氯化鈉可維持均衡的滲透壓;瓊脂是培養基的凝固劑;色素與霍亂弧菌所具有的酶發生特異性反應,水解底物,釋放出顯色基團,在淡黃色平板上產生綠-藍綠色的菌落。
【配方】
霍亂弧菌顯色培養基配方(每升):
蛋白胨 15g
酵母膏粉 5g
蔗糖 10g
氯化鈉 5g
抑菌劑 5g
瓊脂 13g
色素 3.1g
終pH 9.0±0.2
【使用方法】
1、取瓶內干粉56.1克,用100ml蒸餾水或純水溶解,可按比例擴增或縮小。攪拌加熱煮沸至*溶解,不需高壓滅菌,冷至約50℃,傾注滅菌平皿。
2、以無菌操作取檢樣25 g(mL),加入堿性蛋白胨水225 mL,用旋轉刀片式均質器以8 000 r/min均質1 min,或拍擊式均質器拍擊2 min,制備成1:10的均勻稀釋液。如無均質器,則將樣品放入無菌乳缽中磨碎,然后放在500 mL的滅菌容器內,加225 mL堿性蛋白胨水,并充分振蕩。
3、增菌:將上述1:10稀釋液于36 ℃±1 ℃培養6h~8h,如有需要可進行二次增菌。
4、分離
在增菌液中用接種環取一環,于霍亂弧菌顯色平板上劃線分離,于36 ℃±1 ℃培養18 h~24 h。
5、通過驗證試驗進一步確認假定性霍亂弧菌,如氧化酶、革蘭氏染色等。
【質量控制】
本品傾注平皿后呈淡黃色,下列菌株接種后36±1℃培養18-24小時生長情況如下表:
注:后的鑒定須做補充試驗。
外觀:
脫水培養基:淺黃色具流動性粉未。
制備好平板:淡黃色的膠。
儲存條件和保質期:
脫水培養基:10-30℃,保質期二年。 制備好平板: 2-8℃,多保存兩周。
結果判斷